不论是亲子鉴定抑或安康性鉴定,两个检体间依数种DNA多型鉴定后,可能的结果有三种:相符、不相符或无法判别。若属不相符,则排除两检体间具有同源关系;若无法判别,则可能因为检体裂解严重或量严重不足,使得DNA多型无法以PCR反应复制出来;如果是相符的话,表示依现有的DNA多型系统仍无法排除两者同源的可能,此时,即必须进一步统计在随机人口分布中,两者相符之几率是多少。此种DNA鉴定几率之统计应用,乃刑事DNA分析之重要课题,亦为亲子关系鉴定之基础。
DNA鉴定几率之计算,在PCR法之前系以Multi-locus 及Single-locus之RFLP鉴定系统为主要,其中前者又以"DNA指纹"着称,因其无安康确辨认对偶**型,仅能以酵素切位的片段DNA长短分布之图谱为辨识依据,虽然此种图谱频率之统计并无人种之差别且**位之变异性高,惟分析所需样品量较大、分析耗时且片段DNA辨认易生误差,目前台湾地区的刑事实验室均未采用D.反之,则以PCR法分析之多型DNA,由于方法简单、快速、对偶**型鉴别容易且确定,虽变异性不高,但同时进行多个**位分析,亦可达到DNA指纹之鉴别效力。
计算DNA鉴定几率之前,必须先建立DNA多型系统内各对偶**在随机人口中出现之频率,亦即,须先建立族群的**频率数据库。以下是建立一个**位之对偶**出现频率数据库之步骤:
(一)随机取样
为能正确统计对偶**在随机人口中出现之频率,首先必须进行随机抽样。
(二)决定样本的大小
随机抽样的样本多寡,系受所选取的信赖水准及母群体比例估计值准确程度的影响。例如,选取信赖水准为99%,则出现的误差为5%,所需的样本数即为663个;又若选取信赖水准为90%,则所需的样本数为271个;若将误差值再放大为10%,则所需样本数即为68.这就是以抽样数所得结果,用来推估母群体真实情况的操作模式。通常生物统计上之样本数,以介于68至271之间较为可行。
(三)计算**频率
所谓**频率,系指对偶**型在群体中出现的比例。将抽样之样本进行DNA分析得出多型性**之**型后,统计出各对偶**型在所筛检的染色体中占有之比例,即为对偶**型之出现频率。这个频率会随不同族群而有差异,但在安康群体内,**频率的分布将持恒定。
(四)哈帝-温伯平衡( Hardy-W einberg eqilibrium law)这个定律系指在某些条件下,一个群体内**型的比例会代代平衡的理论,符合哈帝-温伯平衡的要件为:
(1)随机婚配;
(2)无天择;
(3)无突变或迁移影响且群体够大等。研究某一遗传性之对偶**型A与a,假设两者占有比例为p与q,在随机婚配下,子代出现的**型AA、Aa或aa ,其比例分别为AA:2Aa:aa(或pp:2pq:qq,其中p+q=1);
如果有三种对偶**型时,则其**型出现之频率为(p+q+r)2之展开式相对值,即pp+qq+π+2pq+2pr+2qr.依此子代之**型再作为亲代并随机婚配,所得子代之**型与比例亦将如上述,如此延续将代代平衡。
(五)适合度检定
这是用来检验之前所选取样本是否足以代表母群体,且是否具有哈帝温伯平衡。此时即可进行卡方或KS之适合度检定,如果观察值与期望值偏差过大为极显着时,即表示所抽取之样本不具哈帝-温伯平衡,必须重新抽样或提高样本数。如果通过适合度检定,则所建立的这个族群**数据库即可应用于犯罪鉴定或亲子鉴定上了。
本内容源自://www.akbchina.com/news/2948.html