专业亲子鉴定师会碰到的DNA亲子鉴定问题

发布时间:2020-03-05 文章来源:安康生物

    专业亲子鉴定师会碰到的DNA亲子鉴定问题,DNA亲子鉴定技术上的问题点系指从技术性的层面检验有无错误鉴定的情形发生之谓,所提供的是在每个鉴定阶段应该去注意、质疑的地方。这里可以分为以下几个阶段检讨:

专业亲子鉴定师会碰到的DNA亲子鉴定问题

    一、DNA淬取阶段


    1.是否仅有DNA被淬取出来,这可以用分光光度计测量DNA的浓度值即可了解。


    2. DNA腐坏、裂解的程度,亦即,检测界限的问题。


    3.从陈旧的检体中淬取DNA的方法是否适当。


    4.二阶段细胞溶解法是否可行。


    5. DNA检体的量(参考值):


    (1)血斑:2mmx2mm(全血时1μl以上)


    (2)精液斑:1 mmx1 mm


    (3)精液与阴道分泌物混合斑:5 mm x5 mm


    (4)身体组织片:2mm


    (5)含毛囊的毛发:1 ~2根


    (6)唾液或唾液斑:尽量采取。


    二、PCR反应阶段


    1.VNTR法之周边碱基序列是否正确地被设定。


    2.对于重复次数之检测,是否有设定正确的控制组,且其控制组有无充足。


    3.是否有因引子接合错误产生非特异性的PCR复制产物。


    4.有无因试剂污染而检测出外来性DNA之可能。


    三、电泳


    1.影响DNA分子电泳距离的外来因素是否存在(例如,凝胶的污染等)。


    2.所使用的DNA标记(sizemarker)是否能够正确地对照出电泳的距离。


    3.并列的两条染色带(band)是否同时进行电泳,有无可能是个别地先后进行(亦即两者电泳条件有无差异)。


    4.DNA的多层次构造与电泳距离的关系能否正确地被反映出来。


    四、点墨杂交法


    1.探针( probe)是否具有特异性(能否与欲检测的DNA相结合)。


    2.凝胶的碱化处理是否正确地执行。


    五、定序( sequencing)


    1.直接定序抑或转殖化定序,每种步骤是否能适当正确地被执行。


    2.自动定序仪的信赖性与界限,每次分析的碱基数有多少个。


    六、RFLP


    1.限制酵素是否能够正确认识该特定DNA序列而予切断。


    2.切断后有无再结合的危险。


    七、出现频率


    1.出现频率之本质为何。


    2.信赖性判断之基准。


    3.哈帝-温伯平衡是否充分(亦即是否符合卡方检定)。


    八、染色带条纹之解析


    1.解读及判断的问题。


    2.染色带位移(band-shift)的问题。


    3.计算机图像解析的信赖性。

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