海淀亲子鉴定师怎么做提取血液,口腔,毛发中的DNA

发布时间:2020-04-09 文章来源:安康生物

    从血样中提取DNA:在1.5mL离心管中加1mL纯水,然后加入血样(不少于3μL血液或9mm2血斑),小心混匀;放置30 min,间歇振荡;10,000-15,000 r/min离心2-3 min;小心移去上清液。若样品为血斑,则保留载体;


    沉淀中加入5% Chelex 100 (100-200目) 200 μL, 56C保温30 min;高速振荡5-10s; 沸水浴8 min;


    高速振荡5-10 s; 10,000-15,000 r/min离心2-3 min,取上清液用于扩增反应; 2-8C保存或冻存剩余DNA.

海淀亲子鉴定师怎么做提取血液,口腔,毛发中的DNA

    从口腔刮拭物样本中提取DNA:


    用牙签刮拭口腔粘膜, 将其放入1.5 mL离心管内,加入200 μL 5% Chelex (100-200 目);搅动,使细胞脱落: 56"C 保温15-30 min; 高速振荡5-10s, 沸水煮8 min; 高速振荡5-10s,10,000-15,000 r/min离心2-3 min;取上清液用于扩增反应: 2-8"C保存或冻存剩余DNA.


    从毛发中提取DNA:


    用纯水清洗毛发; 剪取毛根部分,放入1.5 mL Eppendorf管中;加入 200 μL 5% Chelex 100 (100-200 目)及2μL 10 mg/mL PK (蛋白酶K), 56"C保温 6-8 hr或过夜;高速振荡5-10s;沸水煮8 min (注意毛发应浸没于Chelex液中);


    高速振荡 5-10 s; 10,000-15,000 r/min离心2-3 min;取上清液用于扩增反应,2-8C保存或冻存剩余DNA.

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