北京亲子鉴定,DNA基因会半保留复制机理

发布时间:2020-04-26 文章来源:安康生物

    北京亲子鉴定中心学习到用一定的介质在离心管内形成一个连续或不连续的密度梯度,将细胞悬浊液或匀浆置于介质的顶部通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。  这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降两种。


    速度沉降( velocity sedimentation)


    速度沉降主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。这种沉降方法所采用的介质密度较低 ,介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。生物颗粒(细胞或细胞器)在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离目的。

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    等密度沉降(isodensity centrifugation)


    当不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,在密度梯度介质中,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一直移动到与它们各自的密度恰好相等的位置上形成区带,从而使不同浮力密度的物质得到分离。


    等密度梯度离心一般常用氯化铯(CsC1)、蔗糖、甘油等做介质。介质梯度不需预先制备,离心时把密度均一的介质液和样品均匀混合后装入离心管,用超离心机对溶液长时间加一个离心力场以达到沉降平衡,在离心管内从液面到底部形成连续或不连续的密度梯度。


    若在该溶液里加入少量大分子溶液,则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降,比溶剂密度小的部分就会上浮,最后在重力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子带状物。此法一般应用于分析物质的大小相近,而密度差异较大的核酸、亚细胞器和质粒等。1958年米西尔逊(M.Meselson)和斯塔尔(F.W.Stahl)用氯化绝密度梯度离心成功地分离了[15N]DNA和[14N]DNA,首次证明了DNA的半保留复制机理。


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